紫外分光光度計的工作原理基于朗伯-比爾定律,通過測定物質對特定波長紫外可見光的吸收程度來進行定性和定量分析。以下是其工作原理的具體介紹:
1.光源提供光譜
光源類型:紫外可見分光光度計使用不同類型的光源來覆蓋所需的光譜范圍。在紫外區通常使用氫燈或氘燈,而在可見區則使用鎢燈或鹵鎢燈。這些光源能夠提供足夠強度的連續光譜,確保樣品在不同波長下的吸收特性可以被準確測量。
光源穩定性:光源的穩定性是保證測量準確性的關鍵因素之一。穩定的光源可以確保在測量過程中光譜的一致性,從而減少誤差。
2.單色器選擇波長
色散元件:單色器中的色散元件(如棱鏡或光柵)將光源發出的復合光分解成單一波長的光。這一步驟是實現高精度測量的基礎,因為不同物質對不同波長的光有不同的吸收特性。
所需波長的選擇:根據被測物質的特性,選擇合適的波長進行測量。例如,某些化合物在紫外區有較強的吸收,而另一些可能在可見區有特征吸收峰。
3.吸收池盛放樣品
材質選擇:吸收池通常由石英或玻璃制成,前者適用于紫外到可見區,后者僅適用于可見區。這是因為石英對紫外光具有良好的透過性,而普通玻璃則會吸收紫外光。
設計要求:吸收池的設計要求其底及兩側為毛玻璃,另兩面為光學透光面,以減少光的反射損失。此外,吸收池的光學面必須垂直于光束方向,以確保測量的準確性。
4.紫外分光光度計檢測器檢測光強
光電轉換:檢測器的功能是將透過吸收池的光信號轉換為電信號。常用的光電轉換元件包括光電管、光電倍增管及光二極管陣列檢測器等。
信號處理:轉換后的電信號經過放大和處理后,可以用于進一步的數據分析和顯示。現代紫外可見分光光度計通常配備有微處理機、熒光屏顯示和記錄儀等設備,以便實時顯示和記錄測量結果。
5.信號處理器分析數據
數據處理:信號處理器負責接收來自檢測器的電信號,并將其轉換為吸光度值。這些數據隨后用于計算樣品的濃度或其他相關參數。
結果顯示:最終的測量結果可以通過數字顯示或圖形方式呈現給用戶。高級儀器還可以提供自動記錄和打印功能,方便數據的保存和后續分析。
